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技術文章

Chroma濾光片篩選具有不同顏色強度的細菌克隆

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  Chroma提供多種TIRF濾光片,應用了激光截止濾光片和帶通濾光片的系列濾光片組,包含額外的長通濾光片,可以極大地提高截止TIRF激光的能力。所有的濾光片都安裝在濾光片立方內,具有超高的信噪比。用于TIRF激光無變形反射的2mm厚度的超平面二向色鏡,具有平整度flatness=/>0.5waves/inchP-V,RWD。所有的TIRF鏡片組都安裝在金屬立方內。
  
  Chroma濾光片,用于篩選具有不同顏色強度的細菌克隆??筛鼡Q的濾光片可以持續(xù)使用10次,并改善對彩色克隆的識別,以準確地挑取出所需的克隆。兼容QPix™軟件2.0版本以及更高版本。
  
  濾光片的選型:
  
  如何選擇合適的濾光片是廣大科研人員在項目過程中需要考慮的問題。濾光片選型的一般原則是在成像端盡可能讓熒光/發(fā)射光透過,同時*阻擋激發(fā)光,獲得高的信噪比。尤其是對于多光子激發(fā)和全內反射顯微鏡的應用,微弱的噪聲也會對成像效果造成很大的干擾,因此對信噪比的要求更高。
  
  通常判斷濾光片的參數(shù)一般會看透射率光譜,但往往熒光相對于激發(fā)光的強度非常弱,因此選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值,OD值更能直觀地反映濾光片對光的阻擋特性。
  
  在選擇激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片時,兩者的阻擋深度光譜交點(OD交點)是重要的判斷標準,一般要求寬場光源激發(fā)時交點OD值大于5,激光激發(fā)時大于OD6,以實現(xiàn)較好的熒光信噪比。有時激發(fā)和發(fā)射濾光片(EX和EM濾光片)的透射光譜組合看起來很,但轉換成OD值之后卻發(fā)現(xiàn)光譜交點僅為OD1,不符合熒光成像的基本要求。因此,一般會建議激發(fā)和發(fā)射濾光片的透射光譜有一定的距離,比如10nm。
  
  

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